VALORES TEÓRICOS:

Los estudios con el test ELECSYS CEA se realizaron con 352 personas sanas. Se obtuvieron los siguientes resultados:

Cada laboratorio debería comprobar si los intervalos de referencia pueden aplicarse a su grupo de pacientes y, en caso necesario, establecer sus propios valores.

USO PREVISTO:

Test inmunológico in vitro para la determinación cuantitativa del antígeno carcinoembrionario en suero y plasma humanos. Este test se aplica además en mediciones en serie de CEA como ayuda en el manejo de pacientes con cáncer.

Este inmunoensayo de electroquimioluminiscencia (electrochemiluminescence immunoassay) "ECLIA" está previsto para el uso en inmunoanalizadores cobas e.

MEDIDAS DE PRECAUCIÓN Y ADVERTENCIAS:

Para el uso diagnóstico in vitro por los profesionales de la salud. Observe las medidas de precaución usuales para la manipulación de reactivos de laboratorio.

Residuos infecciosos o microbiológicos:

Advertencia: manipule los residuos como material biológico potencialmente peligroso. Deseche los residuos de acuerdo con las instrucciones y procedimientos de laboratorio aceptados.

Peligros ambientales: Aplique todas las normas locales de eliminación pertinentes para asegurar una eliminación segura.

Existe una ficha de datos de seguridad a disposición del usuario profesional que la solicite.

El presente estuche contiene componentes que han sido clasificados por la directiva CE No. 1272/2008 de la siguiente manera:

Advertencia:

Las indicaciones de seguridad del producto corresponden a los criterios del sistema globalmente armonizado de clasificación y etiquetado de productos químicos (GHS por sus siglas en inglés) válidas en la UE.

Contacto telefónico internacional: +49-621-7590

Evite la formación de espuma en reactivos y muestras de todo tipo (especímenes, calibradores y controles).

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD:

Conservar a 2-8°C.

No congelar.

Conservar el cobas e pack en posición vertical para garantizar la disponibilidad total de las micropartículas durante la mezcla automática antes del uso.

DILUCIÓN:

Las muestras con concentraciones de CEA superiores al intervalo de medición pueden diluirse con Diluent Universal. Se recomienda una dilución de 1:50 (por los analizadores o de forma manual). La muestra diluida debe tener una concentración ≥ 20 ng/mL.

Multiplicar los resultados obtenidos tras dilución manual por el factor de dilución.

El software del analizador tiene en cuenta la dilución automática al calcular la concentración de la muestra.

MATERIAL REQUERIDO ADICIONALMENTE (NO SUMINISTRADO):

• 11731645322, CEA CalSet, 4 x 1.0 mL

• 11776452122, PreciControl Tumor Marker para 4 x 3.0 mL

• 11731416190, PreciControl Universal para 4 x 3.0 mL

• 07299001190, Diluent Universal, 36 mL de diluyente para muestras

• Equipo usual de laboratorio

• Analizador cobas e

Materiales adicionales para los analizadores cobas e 402 y cobas e 801:

• 06908799190, ProCell II M, 2 x 2 L de solución del sistema

• 04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L de solución de limpieza para la célula de medida

• 07485409001, Reservoir Cup, 8 recipientes para ProCell II M y CleanCell M

• 06908853190, PreClean II M, 2 x 2 L de solución de lavado

• 05694302001, Bandeja de Assay Tip/Assay Cup, 6 x 6 bandejas, cada una con 105 cubetas y 105 puntas de pipeta (3780 determinaciones), 3 cartones de residuos sólidos

• 07485425001, Liquid Flow Cleaning Cup, 2 recipientes para la solución de limpieza ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean para la unidad de detección Liquid Flow Cleaning Detection Unit

• 07485433001, PreWash Liquid Flow Cleaning Cup, 1 recipiente para la solución de limpieza ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean para la unidad de prelavado Liquid Flow Cleaning PreWash Unit

• 11298500316, ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean, 5 x 100 mL de solución de limpieza para el sistema

MATERIAL SUMINISTRADO:

Consultar la sección "Reactivos - Soluciones de trabajo" en cuanto a los reactivos suministrados.

CALIBRACIÓN:

Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente al primer estándar de referencia IRP 73/601 de la OMS.

La curva máster predefinida es adaptada al analizador a través del CalSet correspondiente.

Intervalo de calibraciones: Efectuar la calibración una vez por lote con reactivos frescos de un cobas e pack registrado como máximo 24 horas antes en el analizador.

El intervalo de calibración puede ampliarse si el laboratorio asegura una verificación aceptable de la calibración.

Se recomienda repetir la calibración:

• Después de 12 semanas si se trata del mismo lote de reactivos.

• Después de 28 días (si se emplea el mismo cobas e pack en el analizador).

• En caso necesario: por ejemplo, si los valores del control de calidad están fuera del intervalo definido.

CONTROL DE CALIDAD:

Efectuar el control de calidad con PreciControl Tumor Marker o PreciControl Universal.

Adicionalmente pueden emplearse otros controles apropiados.

Los controles de los diferentes intervalos de concentración deberían efectuarse junto con el test en determinaciones simples por lo menos 1 vez cada 24 horas, con cada cobas e pack y después de cada calibración.

Adaptar los intervalos y límites de control a los requisitos individuales del laboratorio. Los resultados obtenidos deben hallarse dentro de los límites definidos. Cada laboratorio debería establecer medidas correctivas a seguir en caso de obtener valores fuera del intervalo definido.

Si fuera necesario, repetir la medición de las muestras en cuestión.

Cumplir con las regulaciones gubernamentales y las normas locales de control de calidad pertinentes.

CÁLCULO:

El analizador calcula automáticamente la concentración de analito de cada muestra (en ng/mL o μg/L).

1 ng/mL de CEA corresponde a 16.9 mUI/mL.

ESPECIFICIDAD ANALÍTICA:

No se ha analizado la reactividad cruzada con glucoproteínas hepáticas y pulmonares.

INFORMACIÓN DEL SISTEMA:

Nombre abreviado: CEA

ACN (código de aplicación): 10003

Nota: El valor medido de CEA de una muestra de paciente puede variar según el método de ensayo aplicado. Por lo tanto, el laboratorio siempre debe indicar el método de determinación de CEA empleado. Los valores de CEA de un paciente, obtenidos mediante diferentes procedimientos de test, no pueden compararse entre sí de forma directa pudiendo dar lugar a interpretaciones erróneas por parte del médico.

En caso de cambiar el método de determinación de CEA durante el control del tratamiento, los valores del mismo deben confirmarse en el periodo de transición mediante mediciones paralelas de ambos métodos.

LÍMITES E INTERVALOS:

Intervalo de medición: 0.3-1000 ng/mL (definido por el límite de blanco y el máximo de la curva máster). Los valores inferiores al límite de blanco se indican como < 0.3 ng/mL. Los valores superiores al intervalo de medición se indican como > 1000 ng/mL o, en muestras diluidas al 1:50, hasta 50000 ng/mL.

Límites inferiores de medición:

Límite de Blanco, Límite de Detección y Límite de Cuantificación:

• Límite de Blanco = 0.3 ng/mL

• Límite de Detección = 0.6 ng/mL

• Límite de Cuantificación = 1.8 ng/mL

El Límite de Blanco, el Límite de Detección y el Límite de Cuantificación fueron determinados cumpliendo con los requerimientos EP17-A2 del Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio (CLSI-Clinical and Laboratory Standards Institute).

El Límite de Blanco es el valor del percentil 95 obtenido a partir de n ≥ 60 mediciones de muestras libres de analito en varias series independientes. El Límite de Blanco corresponde a la concentración por debajo de la cual se encuentran, con una probabilidad del 95%, las muestras sin analito.

El Límite de Detección se determina basándose en el Límite de Blanco y en la desviación estándar de muestras de baja concentración. El Límite de Detección corresponde a la menor concentración de analito detectable (valor superior al Límite de Blanco con una probabilidad del 95%).

El Límite de Cuantificación es la menor concentración de analito cuya medición puede reproducirse con un coeficiente de variación para la precisión intermedia de ≤ 20%.

Se efectuó un estudio interno sobre la base del protocolo EP17-A2 del CLSI. El límite de blanco y el límite de detección se determinaron resultando:

• Límite de Blanco = 0.134 ng/mL

• Límite de Detección = 0.269 ng/mL

El Límite de Cuantificación se determinó con ≥ 4 muestras de suero humano durante 5 días en 5 réplicas por día en 1 analizador. El Límite de Cuantificación fue de 0.403 ng/mL con un coeficiente de variación para la precisión intermedia de ≤ 20%.

PRECISIÓN:

La precisión ha sido determinada mediante reactivos Elecsys, muestras y controles según un protocolo (EP05-A3) del CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 2 ciclos diarios por duplicado, cada uno durante 21 días (n = 84). Se obtuvieron los siguientes resultados:

b) TM = Tumor Marker.

c) U = Universal.

CARACTERÍSTICAS::

El antígeno carcinoembrionario (CEA) es una molécula altamente glucosilada con un peso molecular de aproximadamente 180 kDa.1 Al igual que la AFP, el CEA pertenece al grupo de los antígenos carcinofetales producidos durante el perIodo embrionario y fetal. Se ha postulado que el CEA tiene una función en varios procesos biológicos incluyendo la adherencia celular, la inmunidad y la apoptosis.2 La formación de CEA se reduce tras el nacimiento de modo que en el tejido de adultos sanos se encuentra en cantidades reducidas.2 Por esta razón solo se encuentran concentraciones muy bajas en la sangre de adultos sanos.2 La familia genética del CEA consiste en unos 17 genes activos que se dividen en dos subgrupos. El CEA pertenece al primer grupo junto con los antígenos no específicos de reacción cruzada (NCA), mientras que el segundo grupo está formado por las glucoproteínas específicas del embarazo (PSG).3 En caso de adenocarcinoma colorrectal frecuentemente se miden altas concentraciones de CEA.4 Los valores de CEA aumentan de forma leve a moderada en enfermedades no malignas del intestino, el páncreas, el hígado y los pulmones (p. ej. en la cirrosis hepática, la hepatitis crónica, la pancreatitis, la colitis ulcerosa y la enfermedad de Crohn).5 El tabaquismo también puede llevar a valores elevados de CEA lo que debe tenerse en cuenta al interpretar las concentraciones de CEA.6 La determinación de CEA no se recomienda para el cribado de cáncer de la población general pues concentraciones de CEA dentro del intervalo normal no excluyen la presencia de una enfermedad maligna. La indicación principal de la determinación de CEA es el seguimiento del tratamiento del cáncer colorrectal, la identificación de recidivas tras un tratamiento o una resección quirúrgica, y la identificación y la estadificación de metástasis.7

Se aconseja la determinación preoperatoria de CEA dado que brinda información pronóstica independiente, respalda el tratamiento quirúrgico y proporciona un nivel basal para determinaciones posteriores. En pacientes agrupados en los estadios II y III, los niveles de CEA deben medirse cada 2 a 3 meses durante como mínimo 3 años después del diagnóstico. También en el seguimiento de una enfermedad avanzada, el valor CEA debería analizarse cada 2 a 3 meses.8,9 Los anticuerpos del test ELECSYS CEA reaccionan con CEA y con el antígeno del meconio (NCA-2).10,11 Especialmente la reacción cruzada con NCA-2 se reveló útil en la detección precoz de metástasis y recidivas del cáncer colorrectal.12

Se han caracterizado los determinantes antigénicos del CEA, dividiéndose los anticuerpos monoclonales disponibles en 5 grupos de epítopos.2,11 Los anticuerpos del test ELECSYS CEA reaccionan con los epítopos 2 y 5.

LIMITACIONES DEL ANÁLISIS - INTERFERENCIAS:

Se analizaron los efectos de las siguientes sustancias endógenas y los siguientes compuestos farmacéuticos sobre el funcionamiento del test sin que se hayan observado interferencias.

Sustancias endógenas:

Criterio: recuperación ± 1 ng/mL del valor inicial ≤ 10 ng/mL y ± 10% del valor inicial > 10 ng/mL.

En pacientes en tratamiento con altas dosis de biotina (> 5 mg/día), no recoger la muestra antes de transcurridas como mínimo 8 horas tras la última administración.

No se ha registrado el efecto prozona (high-dose hook) con concentraciones de CEA de hasta 200000 ng/mL.

Compuestos farmacéuticos: Se analizaron in vitro 16 fármacos de uso extendido sin encontrar interferencias con el presente ensayo.

Adicionalmente se analizaron los siguientes fármacos anticancerígenos sin encontrar interferencias con el presente ensayo.

Fármacos anticancerígenos:

En casos aislados pueden presentarse interferencias por títulos extremadamente altos de anticuerpos dirigidos contra anticuerpos específicos del analito, la estreptavidina o el rutenio. Estos efectos se han minimizado gracias a un adecuado diseño del test.

Para el diagnóstico, los resultados del test siempre deben interpretarse teniendo en cuenta la anamnesis del paciente, la exploración clínica así como los resultados de otros exámenes.

SÍMBOLOS:

Roche Diagnostics utiliza los siguientes símbolos y signos adicionalmente a los indicados en la norma ISO 15223-1 (para los EE.UU.: consulte dialog.roche.com para la definición de los símbolos usados):

La barra del margen indica suplementos, eliminaciones o cambios.

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OBTENCIÓN Y PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS:

Solo se ha analizado y considerado apto el tipo de muestras aquí indicado.

Suero recogido en tubos estándar de muestra o en tubos que contienen gel de separación.

Plasma tratado con heparina de litio o con EDTA di o tripotásico. Pueden emplearse tubos para plasma que contengan gel de separación.

Criterio: pendiente 0.9-1.1 + coeficiente de correlación ≥ 0.95.

Estable durante 7 días a 20-25°C, 14 días a 2-8°C, 6 meses a -20°C (± 5°C). Las muestras pueden congelarse 3 veces.

Los tipos de muestra aquí indicados fueron analizados con tubos de recogida de muestras seleccionados, comercializados en el momento de efectuar el análisis, lo cual significa que no fueron analizados todos los tubos de todos los fabricantes. Los sistemas de recogida de muestras de diversos fabricantes pueden contener diferentes materiales que, en ciertos casos, pueden llegar a afectar los resultados de los análisis. Si las muestras se procesan en tubos primarios (sistemas de recogida de muestras), seguir las instrucciones del fabricante de tubos.

Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes de realizar el ensayo.

No emplear muestras inactivadas por calor.

No utilizar muestras ni controles estabilizados con azida.

Se debe garantizar una temperatura de 20-25°C para la medición de muestras y calibrador

Para evitar posibles efectos de evaporación, determinar las muestras y los calibradores que se sitúan en los analizadores dentro de un lapso de 2 horas.

PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS:

Los reactivos incluidos en el kit están listos para el uso y forman una unidad inseparable.

La información necesaria para el correcto funcionamiento está disponible a través de cobas link.

COMPARACIÓN DE MÉTODOS:

Una comparación entre el test ELECSYS CEA, 07027079190 (analizador cobas e 801; y) y el test ELECSYS CEA, 11731629322 (analizador cobas e 601; x) generó las siguientes correlaciones (en ng/mL):

Número de muestras de suero medidas: 141

Las concentraciones de las muestras se situaron entre 0.641 y 965 ng/mL. Una comparación entre el test ELECSYS CEA, 07027079190 (analizador cobas e 402; y) y el test ELECSYS CEA, 07027079190 (analizador cobas e 801; x) generó las siguientes correlaciones (en ng/mL):

Número de muestras medidas: 139

Las concentraciones de las muestras se situaron entre 0.488 y 986 ng/mL.

DATOS ESPECÍFICOS DEL FUNCIONAMIENTO DEL TEST:

A continuación, se indican los datos representativos del funcionamiento de los analizadores. Los resultados de cada laboratorio en particular pueden diferir de estos valores.

PRINCIPIO DEL TEST:

Técnica sándwich: Duración total del test: 18 minutos.

• 1.ª incubación: 6 μL de muestra, un anticuerpo monoclonal biotinilado anti-CEA y un anticuerpo monoclonal anti-CEA marcado con quelato de rutenioa) forman un complejo sándwich.

• 2.ª incubación: después de incorporar las micropartículas recubiertas de estreptavidina, el complejo formado se fija a la fase sólida por interacción entre la biotina y la estreptavidina.

• La mezcla de reacción es trasladada a la célula de medida donde, por magnetismo, las micropartículas se fijan a la superficie del electrodo. Los elementos no fijados se eliminan posteriormente con ProCell II M. Al aplicar una corriente eléctrica controlada se produce una reacción quimioluminiscente cuya emisión de luz se mide con un fotomultiplicador.

• Los resultados se determinan mediante una curva de calibración generada específicamente para el instrumento a partir de una calibración a 2 puntos y una curva máster suministrada a través de cobas link.

a) Quelato Tris (2,2’-bipiridina)rutenio(II) (Ru(bpy))

REACTIVOS - SOLUCIONES DE TRABAJO:

El cobas e pack está etiquetado como CEA.

M Micropartículas recubiertas de estreptavidina, 1 frasco, 16.0 mL: Micropartículas recubiertas de estreptavidina: 0.72 mg/mL, conservante.

R1 Anticuerpo anti-CEA~biotina, 1 frasco, 21.0 mL: Anticuerpo biotinilado monoclonal anti-CEA (ratón/humano) 3.0 mg/L; tampón fosfato 100 mmol/L, pH 6.0; conservante.

R2 Anticuerpo anti-CEA~Ru(bpy), 1 frasco, 15.8 mL: Anticuerpo monoclonal anti-CEA (ratón) marcado con quelato de rutenio 4.0 mg/L; tampón fosfato 100 mmol/L, pH 6.5; conservante.

REALIZACIÓN DEL TEST:

Para garantizar el funcionamiento óptimo del test, observe las instrucciones de la presente metódica referentes al analizador empleado. Consulte el manual del operador apropiado para obtener las instrucciones de ensayo específicas del analizador.

Las micropartículas se mezclan automáticamente antes del uso.

Colocar el cobas e pack refrigerado (a 2-8°C) en el gestor de reactivos (reagent manager). Evitar la formación de espuma. El analizador realiza automáticamente los procesos de atemperar, abrir y tapar el cobas e pack.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

1. Thompson J, Zimmermann W. The carcinoembryonic antigen gene family: structure, expression and evolution. Tumour Biol 1988;9(2-3):63-83.

2. Hammarström S. The carcinoembryonic antigen (CEA) family: structures, suggested functions and expression in normal and malignant tissues. Semin Cancer Biol 1999;9(2):67-81.

3. Thompson JA. Molecular cloning and expression of carcinoembryonicantigen gene family members. Tumor Biol 1995;16:10-16.

4. Ballesta AM, Molina R, Filella X, et al. Carcinoembryonic Antigen in Staging and Follow-up of Patients with Solid Tumors. Tumor Biol 1995;16:32-41.

5. Ruibal Morell A. CEA serum levels in nonneoplastic disease. Int J Biol Markers 1992;7(3):160-166.

6. Fukuda I, Yamakado M, Kiyose H. Influence of Smoking on Serum Carcinoembryonic Antigen Levels in Subjects Who Underwent Multiphasic Health Testing and Services. J Med Syst 1998;22(2):89-93.

7. Duffy MJ. Carcinoembryonic antigen as a marker for colorectal cancer. Is it clinically useful? Clin Chem 2001; 47(4): 624-630.

8. Duffy MJ, Van Dalen A, Haglund C, et al. Clinical utility of biochemical markers in colorectal cancer: European Group on Tumour Markers (EGTM) guidelines. Eur J Cancer 2003;39(6): 718-727.

9. Sturgeon CM, Duffy MJ, Stenman UH, et al. National Academy of Clinical Biochemistry Laboratory Medicine Practice Guidelines for Use of Tumor Markers in Testicular, Prostate, Colorectal, Breast and Ovarian Cancers. Clin Chem 2008;54(12): e11-e79.

10. Kuroki M, Haruno M, Arakawa F, et al. Reaction profiles of seven enzyme immunoassay kits for carcinoembryonic antigen (CEA) analyzed with purified preparations of CEA and related normal antigens. Clin Biochem 1992;25:29-35.

11. Bormer OP, Thrane-Steen K. Epitope group specificity of six immunoassays for carcino-embryonic antigen. Tumor Biol 1991;12:9-15.

12. Hanada H, Muggi S, Takeoka K, et al. Early detection of colorectal cancer metastasis and relapse by recognizing non-specific cross- reacting antigen 2 in commercial carcinoembryonic antigen assays. Clin Chem 2009;55(9):1747-1748.

13. Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790.

Para más información acerca de los componentes, consultar el manual del operador del analizador, las hojas de aplicación y las metódicas correspondientes (disponibles en su país).

En la presente metódica se emplea como separador decimal un punto para distinguir la parte entera de la parte fraccionaria de un número decimal. No se utilizan separadores de millares.

Todo incidente grave que se haya producido en relación con el producto se comunicará al fabricante y a la autoridad competente del estado miembro en el que se encuentre el usuario y/o el paciente.

Para el resumen del informe de seguridad y funcionamiento, consulte: https://ec.europa.eu/tools/eudamed